mFISH能在一次雜交實驗中篩查所有染色體,并不需要預先知道其核型異常。由于它是通過多次雜交實驗找到每條染色體探針的*佳熒光位置,一旦探針構成參數建立了,那么每次雜交的變異就很小,因此可以獲得高度的重復性。mFISH能對中期染色體分裂相進行快速分析,即使有很復雜的大量染色體的重排,也能很快分析出;特別對一些未知來源的標記染色體,能很快根據顏色確定其來源;mFISH更能提供全自動核型分析既克服了常規(guī)核型分析的缺點,又具有部分FISH的優(yōu)點,有其獨特的應用價值。
mFISH用于染色體核型分析,可以鑒定數目異常,一些結構重排,例如簡單和復雜結構易位,比較大的重復和缺失及一些臂間倒位也能簡單鑒定出,重要的是mFISH相對于核型分析來說是全自動,節(jié)省了勞力與時間。
在核型分析中,確定斷裂點也很重要,mFISH可以作為染色體數目異常及一些結構改變的篩選實驗,然后用片段長度分析和染色體帶型轉換圖確定其斷裂點。
但是,mFISH用于核型分析不能檢測臂內倒位、一些臂間倒位、小的重復及缺失(微缺失綜合征),用于檢測隱匿的端粒易位的敏感性還未確定,對于一些中間丟失的斷裂點的確定,只能靠傳統(tǒng)核型分析。為了使mFISH技術更完善,需要設計位置特異性探針,如臂、帶或端粒特異探針。人類基因物理圖譜的建立及染色體顯微切割技術的發(fā)展將大為便利探針庫的建立,并能應用于特殊診斷。
腫瘤細胞遺傳學及標記染色體的鑒定
mFISH用于腫瘤細胞遺傳學分析可以發(fā)現新的染色體異常,如白血病、**瘤及難以進行常規(guī)分析的實體瘤的染色體畸變。白血病和**瘤中*多見的是染色體易位,用傳統(tǒng)核型分析和FISH已經進行了深入細致的研究。其中有一些相互易位的遺傳物質及條帶十分相似,用常規(guī)方法不能分析出。如t(12;21)易位發(fā)生在至少25%的兒童B系急淋患者中,但是由于相互易位染色體的帶型與大小很接近,常規(guī)細胞遺傳學方法的檢出率還不到0.05%。那么還有多少未知的染色體畸變不能用常規(guī)方法檢出,因而也不能用FISH定位。在這方面,用24色FISH將能大大提高檢出率。同樣,至今我們仍不知道有多少白血病患者有正常的染色體核型(多數實驗室報道約15%~20%),mFISH的應用可能為回答這一問題提供有力的手段。
許多腫瘤有著十分復雜的染色體重排,這些重排染色體被稱為標記染色體(marker chromosome)。mFISH在確定標記染色體的來源方面有著突出的優(yōu)點,根據標記染色體上不同的顏色能很快確定其來源。Speicher等用mFISH分析了鱗狀細胞肉瘤細胞系HTB43,很快地確定了其標記染色體的結構重排和各自來源。可以預見,mFISH與常規(guī)核型分析聯(lián)合應用將會使惡性腫瘤染色體異常的診斷達到****的準確。
生物學研究 mFISH可用于種間進化研究,通過比較細胞遺傳學來檢查種系發(fā)生,分析染色體結構域及它們的相互關系,特別可以用于檢查不同物種染色體序列的同源性程度,在植物、生物進化、農業(yè)研究中起到重要的作用。mFISH還能用于間期細胞遺傳學研究,檢測基因的擴增,分析核內組織,定義染色體結構域或多基因家族,確定細胞周期及**階段,為染色體結構和功能研究提供新的信息。
總之,mFISH能應用于臨床研究、腫瘤診斷和科研等各方面,有其獨特的適用范圍及優(yōu)點。它將是傳統(tǒng)細胞遺傳學*好的補充。FISH的出現,使細胞遺傳學進入了一個彩色的時代,而mFISH將是這個時代中又一重要的標志??梢灶A見的是更多的色彩將同時出現在一張標本上,為我們提供更多的細胞遺傳學信息。