多色熒光技術(shù)mFISH 小常識
日期：2025-05-10 08:43
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摘要：
mFISH顧名思義是多色FISH multi-coclour FISH或multiplex FISH, M-FISH 是在單色FISH基礎(chǔ)上發(fā)展起來的多色FISH技術(shù)。該技術(shù)采用兩種以上熒光標(biāo)記DNA探針與靶細(xì)胞中期染色體或間期細(xì)胞核雜交后（可選用美國自然基因有限公司提供的Thermobrite-NatureGene雜交儀），用IMSTAR**熒光檢測系統(tǒng)進(jìn)行雜交信號的檢測與放大，通過兩種或多種不同濾光片組合或特制的一種濾光片觀察，雜交信號呈現(xiàn)出不同的顏色。顏色取決于標(biāo)記物連接的熒光物質(zhì)和復(fù)染染料的不同。例如，連接物有AMCA（藍(lán)色）FITC或dibopy（綠色）rhodamine 或Texas red（紅色）復(fù)染的熒光染料有PI（紅色）DAPI（藍(lán)色）quinacrine(綠色)等。Dauwerse等采取結(jié)構(gòu)標(biāo)記（combination labelling）或比率標(biāo)記(ratio lablling）的策略，以biotin digoxigeinh和FITC標(biāo)記探針，不同比例混合后進(jìn)行雜交，同時(shí)觀察12種不同顏色的雜交結(jié)果。多色FISH技術(shù)可同時(shí)觀察兩種以上DNA探針的雜交信號，是研究幾種不同探針之間關(guān)系的理想手段，如檢測靶序列擴(kuò)增水平，染色體微小缺失和染色體易位攜帶者。多色FISH還適用于診斷不同染色體區(qū)域的結(jié)構(gòu)異?；蛲瑫r(shí)存在的幾種染色體數(shù)量異常。